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气相色谱仪
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什么时候该换气相色谱仪中的色谱柱了?

2020-01-02


    色谱工作者常会碰到这样的问题,什么时候该换气相色谱仪的色谱柱了? 色谱柱的塔板数能表现色谱柱的状态吗?肯定标明一支色谱柱应该“退休”的规范,从经历来看,当一支色谱柱的塔板数降低到新柱子时的百分之几时就能够以为该色谱柱不能再运用了呢?将塔板数作为评价色谱柱质量的独一指标适宜吗?在您的实验室里是如何判别一根色谱柱不能够再用了呢?

气相色谱仪

  塔板数是一个粗略的指标,不能作为评价色谱柱的规范。通常运用塔板数来调查气相色谱仪系统:将新柱子接到仪器上,依据色谱柱消费商提供的测试条件测试该色谱柱,你应该得到和剖析报告上同样的结果。最差也应该得到比报告值低10%的塔板数。假如你所测得的塔板数远远低于厂家提供的报告数据,这就阐明你的色谱系统可能存在一些问题。进样器、柱外效应、毛细衔接以及检测器都是容易呈现问题的中央。


  置信每个气相色谱仪工作者都会关怀分辨率,分辨率是调查一根色谱柱别离详细样品的好坏水平的指标。色谱的中心任务就是为了使每个峰完成别离,我们在实践工作中需求得到合理峰宽的窄峰以便取得较低的检测限(这曾经不是什么难题,如今的色谱柱都能够到达这个请求)。


  但是,我们需求思索的气相色谱仪另一个要素是塔板数对分辨率的影响仅仅是平方根的关系,这意味着当一根色谱柱的塔板数降落50%,分辨率仅仅降落7%。而当一根色谱柱塔板数降落为新柱子一半的时分,你肯定看到了其它愈加严重的病症通知你这根色谱柱的寿命不长了。其实,大多数用户仅仅运用色谱柱塔板数的一小局部。例如,对一支新的150mm×4.6mm,5mm粒径的色谱柱来讲,厂家测试报告上的塔板数为14,000。运用下面的公式能够预算一支色谱柱的塔板:N=3000*L/Dp


  L是色谱柱的柱长,以厘米为单位;Dp是填料的粒径,以微米为单位一支150mm×4.6mm,5mm粒径的色谱柱的柱效大约为9000,比厂家测试数据低30%。在实践的工作中,大多数气相色谱仪办法仅仅需求这些塔板数的一半,这些色谱办法还有优化的空间吗?答案是肯定的。可见,色谱柱的塔板数不是别离中较重要的参数。


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  较好的办法是运用压力、分辨率和峰形的混合指标来调查一根色谱柱的状态。压力的丈量是很容易的,通常我们肯定的气相色谱仪办法要满足以下的请求:用气相色谱仪新柱子时柱压不高于2500psi,在任何状况下压力都不超越3000psi。虽然现代的液相色谱系统都可在更高的压力下运用,但由于高压产生的系统损耗和走漏的问题会很严重。当压力超越3000psi时,思索改换进样器和色谱柱之间的0.5mm孔径的在线滤片。假如改换滤片后压力依然高,则色谱柱的滤片或者是色谱柱曾经被污染,这提示我们该换柱子了。有统计标明,超越60%的色谱柱损坏是由于压力过高的缘由。


  分辨率是我们调查色谱柱的一个十分重要的指标,只需两个组分能够取得基线别离,对该剖析物的定量就不会有什么问题。关于对称的高斯峰来讲,1.5的分辨率即可得到基线别离;若Rs在1.7至2.0之间则更好。若峰拖尾严重则需求更高的分辨率。运用分辨率作为色谱柱的评价指标的益处在于我们能够直观地看到相邻的峰的别离状况。


  另外一个调查色谱柱质量的规范是峰形拖尾状况,厂家测试报告的峰形都十分漂亮,但这并不代表该色谱柱剖析实践样品的状况。实践样品中总是含有或多或少惹起峰形拖尾的组分。值得一提的是含有氮原子的化合物,这些化合物和硅胶骨架上的游离硅羟基分离十分严密,随着色谱柱运用时间越长,键合相流失,拖尾则愈加严重。但是拖尾状况的改动不像分辨率的改动那样可以马上看出来。基于此,较好的方法就是定一个拖尾因子的上限,如美国药典规则拖尾因子不超越1.8。


  肯定色谱柱“丢弃”规范的标准时间是当我们开发剖析办法或作办法认证的时分。通常,在开发剖析办法的过程中你会实验几根色谱柱,剖析足够多的实践样品,你晓得当别离变差的时分是什么样的状况。我倾向于在开端时运用一个宽的范围。我们的经历是这样的:你假如在开端时紧缩系统适用性请求,在认证后再放宽这个请求是很艰难的。在剖析实践样品之行进行系统适用性调查,以确保该色谱办法满足剖析者能够承受的规范。此时的气相色谱仪应该就是该换色谱柱了。


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